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實(shí)驗(yàn)原理
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELIAS)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等有點(diǎn)。
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。馬上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NAN3的樣品，因NAN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作程序
準(zhǔn)備試劑、樣品和標(biāo)準(zhǔn)品→→加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng)30分鐘→→洗板5次，加入酶標(biāo)試劑，37℃反應(yīng)30分鐘→→洗板5次，加入顯色液A、B，37℃顯色10分鐘→→加入終止液→→15分鐘內(nèi)讀OD值→→計(jì)算
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被開(kāi)封后如未使用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各布加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免實(shí)驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高）（樣品OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（N倍）后再測(cè)定計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×N×5)。
5.封板膜只限一次使用，以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存：2-8℃
2.有效期：6個(gè)月
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